DiI、DiO、DiD、DiR是细胞膜荧光探针亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。这些环境敏感性荧光染料在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强。且具有消光系数高、极性依赖性、激发态寿命短等特点。一旦进入细胞膜后，可在整个细胞膜上扩散，较佳浓度时可以使整个细胞膜染色。

 

　　细胞膜荧光探针应用不同的荧光染色（DiI橙色荧光、DiO绿色荧光、DiD红色荧光、DiR深红色荧光）为活细胞多标、流式分析提供了便利：

　　1、DiO和DiI可分别用标准的FITC滤光片和TRITC滤光片检测。

　　2、DiD是DiI的衍生物，具有明显往红光迁移的激发和发射光谱，可以被633nm He-Ne激光激发，并且具有比DiI更长的激发和发射光波长，这一特性使其特别适合标记具显著自荧光效应的细胞或组织。

　　3、DiR具强效的近红外光穿透细胞或组织，并在近红外区具较低的自荧光水平，这些特性使其特适用于体内成像或示踪实验。

 

　　显微镜检测：

　　1、DiD，DiO，DiI，DiR激发波长与发射波长；

　　2、多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

　　①DiI和DiO=Omega XF52，Chroma 51004；

　　②DiI和DiD=Omega XF92，Chroma 51007；

　　③DiI，DiO和DiD=Omega XF93，Chroma 61005。

 

　　流式细胞仪的检测：

　　DiD、DiO、DiI、DiR和DiS染色的细胞可以分别用经典的FL1，FL2，FL3和FL4流式细胞仪检测。