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  • 细胞膜荧光探针在日常使用中有哪些荧光染料?
  • 点击次数:1288 更新时间:2022-08-28
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  •   DiI、DiO、DiD、DiR是细胞膜荧光探针亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。这些环境敏感性荧光染料在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强。且具有消光系数高、极性依赖性、激发态寿命短等特点。一旦进入细胞膜后,可在整个细胞膜上扩散,较佳浓度时可以使整个细胞膜染色。
     
      细胞膜荧光探针应用不同的荧光染色(DiI橙色荧光、DiO绿色荧光、DiD红色荧光、DiR深红色荧光)为活细胞多标、流式分析提供了便利:
      1、DiO和DiI可分别用标准的FITC滤光片和TRITC滤光片检测。
      2、DiD是DiI的衍生物,具有明显往红光迁移的激发和发射光谱,可以被633nm He-Ne激光激发,并且具有比DiI更长的激发和发射光波长,这一特性使其特别适合标记具显著自荧光效应的细胞或组织。
      3、DiR具强效的近红外光穿透细胞或组织,并在近红外区具较低的自荧光水平,这些特性使其特适用于体内成像或示踪实验。
     
      显微镜检测:
      1、DiD,DiO,DiI,DiR激发波长与发射波长;
      2、多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
      ①DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
      ②DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
      ③DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005。
     
      流式细胞仪的检测:
      DiD、DiO、DiI、DiR和DiS染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。
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