线粒体膜电位荧光探针是我们的膜标记1-43的缩写,化学上称为N-(3-三乙基氨基丙基)-4-(4-(二丁基氨基)苯乙烯基)吡啶鎓二溴化物。它是一种水溶性膜探针,属于苯乙烯基染料家族。它广泛用于细胞生物学和神经生物学,因为它对细胞的毒性极小。线粒体膜电位荧光探针在水性介质中几乎不发荧光,并且在与膜结合后强烈发荧光。它用标准荧光素光学滤光片有效激发,并且当与质膜结合时表现出强烈的荧光信号。线粒体膜电位荧光探针经常被用于量化神经元中的胞吐作用。
线粒体膜电位荧光探针是一种新型的用来监测线粒体膜电位变化的荧光探针,是JC-1的*替代物。与JC-1相比,具有以下几个重要优势:
1、溶解性得以改良,在水溶液中形成沉淀可能性明显降低;
2、使用更方便,简化步骤将手动操作时间最小化;
3、荧光信号更高,改良的信号与背景荧光的信噪比;
4、结果更稳定,优化探针以保证更连续性和稳定性结果。
使用方法:
1、染色液制备:
①储存液制备:用DMSO或无水乙醇配置浓度1~5 mM的储存液。例如,取10mg 荧光探针(Mw:460.31 g/mol)溶于4.35ml 无水DMSO中,充分溶解,即得到5mM的储存液。
②工作液制备:用合适的缓冲液稀释储存液,调整到合适的工作浓度。
2、染色方法:
对于细菌染色,最好取对数生长期的健康细菌,用无菌PBS或其他适当平衡盐缓冲液稀释到~1 x 106cells/ml。也可直接从细菌培养液中取适量的细菌不经清洗进行稀释。细菌染色用荧光探针的工作浓度可为30μM,室温染色15~30min。