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  • 用这个方法使用柠檬酸钠缓冲液,既简单又安全
  • 点击次数:1501 更新时间:2022-04-25
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  •   柠檬酸钠缓冲液0. 01mol/L,pH6.0是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而改善免疫染色效果。
     
      通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时,考虑进行抗原修复。
     
      按照每个片子需要10ml抗原修复液计算,1L抗原修复液可以用于100个样本的抗原修复。
     
      柠檬酸钠缓冲液的使用方法:
      本产品是干粉形式,使用前用去离子水或蒸馏水按产品规格溶解至1L或2L,即可使用。
      1、对于石蜡切片:
      ①脱蜡:二甲苯3次,每次3-5min→无水乙醇2次,每次3-5min→95%乙醇1次,3-5min→90%乙醇1次,3-5min→75%乙醇1次,3-5min→蒸馏水洗2次,每次3-5min。
      ②抗原修复:将切片浸泡在柠檬酸修复液中,95-100℃加热约15min。柠檬酸修复液使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30min内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
     
      2、对于冰冻切片:
      用免疫染色洗涤液洗涤切片5min。将切片浸泡在柠檬酸修复液中,95-100℃加热约15min。柠檬酸修复液使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30min内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
     
      3、对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
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