用lip2000脂质体2000进行转染时，首先需要优化转染条件，应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等，对每批LR都要做。先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细胞相互作用的时间，DNA可从1-5ug和孵育时间6h，开始，按这两个参数绘出相应LR需用量的曲线，再选用LR和DNA两者*的剂量，确定出转染时间。因LR对细胞有一定的毒性，转染时间以不超过24h为宜。COS-7、BHK、NIH-3T3、Hela和Jurkat等任何一种细胞均可作为受体细胞。

　　lip2000脂质体2000的转染方法常见有两种，具体如下：

　　一、快速lip2000脂质体2000转染法操作步骤

　　(1)将细胞以5 x 10^5个/孔接种于6孔板中培养24h，使其达到50%-60%板底面积。在试管中配制DNA-脂质体复合物。

　　a、在1ml无血清DMEM中稀释PSV1-neo质粒DNA或供体DNA。

　　b、旋转1s，再加入脂质体悬液，旋转。

　　c、室温下放置5-10min，使DNA结合在脂质体上。

　　(2)弃去细胞中的旧液，用1ml无血清DMEM洗细胞1次后弃去，向每孔中直接加入1mlDNA-脂质体复合物，37℃培养3-5天。

　　(3)再于每孔中加入含20%胎牛血清的DMEM，继续培养14-24h。

　　(4)吸出DMEM-DNA-脂质体混合物加入新鲜含10%胎牛血清的DMEM，2ml/孔，再培养24-48h。

　　(5)用细胞刮或消化法收集细胞，以备分析鉴定。

　　二、稳定的lip2000脂质体2000转染法

　　接种细胞同前述，细胞长至50%板底面积可用于转染。

　　DNA-脂质体复合物制备转染细胞同前。

　　在每孔中加入1ml含20%胎牛血清的DMEM，37℃培养48h。

　　吸出DMEM，用G418选择性培养基稀释细胞，使细胞生长一定时间，筛选转染克隆，方法参照细胞克隆筛选法进行。