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  • 血清热灭活对细胞的影响
  • 点击次数:2630 更新时间:2016-03-10
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  • Pinyopummintr等证明血清去除灭活步骤不影响牛胚胎的发育分化;有研究结果证实热灭活步骤减弱了胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用,在用SV-BHK、BALB-3T3、CV-1、FS-4细胞对细胞粘附实验中,热灭活对胎牛血清的影响小于对小牛血清的影响。

    我们调查了热灭活对胎牛血清以及对其中不同细胞株生长能力的影响。通过比较11个不同细胞株,发现其中热灭活对6细胞株(HBAE,MDBK,Vero,成纤维细胞,MRC-5)的生长带来负面影响,三个细胞株(FOX-NY,MDCK和CHO-K1)不受热灭活的影响,而只有两个细胞株(Balb/3T3,Sp2/0Ag14 hybrid),在热灭活之后,细胞生长有轻微的改善。所以,在正常的操作下,热灭活通常对细胞的生长没有明显的促进作用。在正常操作下,热灭活经常给血清产品带来负面的影响,对血清的加热经常导致血清中沉淀的产生,而导致的沉淀又常常被认为是微生物的污染。注意到这个现象之后,为了验证污染的存在,或者促进沉淀的溶解,许多培养者往往将血清放置37℃温育。这却往往使情况变得更糟,血清中的蛋白进一步的析出,为了确信血清未被污染,进行的镜检,无菌培养试验,和革兰氏染色试验更是浪费了实验者大量的时间和精力。

           总之,多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下,热灭活并不会改善细胞的生长,却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下,其促进的比率也是微不足道的。另外,血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物的污染,从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。我们建议,对于那些对血清进行灭活的用户,需要通过试验来证实其必要性,确定灭活的适当条件;在灭活过程中,需要严格认真监测,并选择一个可重复的方案进行操作。

       

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