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关于我们首页 > 产品中心 > 生化试剂 > 抗生素 > FS0012Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)
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  • Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)
  • 型号:FS0012
  • 报价:600
  • 地区:上海市
  • 0
  • Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)用于细胞培养实验溶解后过滤除菌。推荐溶剂水,PBS溶液。蛋白质合成抑制剂,可用于植物细胞培养等生化研究。CAS : 31282-04-9
  • 021-34600120
产品详细介绍

Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)

产品信息:

产品编号

产品名称

规格

价格(元)

FS0012-1G

Hygromycin B 潮霉素B(冻干粉)

1g

600.00

FS0012-5G

Hygromycin B 潮霉素B(冻干粉)

5g

2400.00

FS0012-10G

Hygromycin B 潮霉素B(冻干粉)

10g

3840.00

FS0012-10ML

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B50 mg/ml

10ml

680.00

FS0012-20ML

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B50 mg/ml

20ml

1050.00

    

性状/储存

-20℃保存(干粉),4℃保存(液体)

产品属性:

别名 : 湿霉素乙 效高素 潮霉素B干粉
英文名称 : Hygromycin B
CAS : 31282-04-9
储存条件 : -20℃

Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)生物应用 

1)   筛选和维持培养稳定转染Hph+载体的原核细胞或真核细胞(植物细胞和哺乳动物细胞); 

2)   由于作用模式的差异,常与G418 (GeneticinTM)Zeocin blasticidin S联合使用,筛选稳定转染两个不同载体的细胞株;

双抗性稳定转染细胞筛选的抗生素作用机制及抗性

抗生素

抗性机制

抗性基因

哺乳动物筛选浓度

潮霉素B

干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读

Hph

200~500μg/mL

G418

干扰80S核糖体功能和抑制蛋白合成

Tn5/Tn601

100~1000μg/mL

Zeocin

掺入或者切割DNA引起细胞死亡

Sh ble

50~100μg/mL

blasticidin S

核糖体上抑制肽键形成

Bsd/BSD

3~50μg/mL

3抗病毒剂,由于潮霉素B选择性渗透进入病毒感染增强通透性的细胞,而且具有抑制翻译的功效;

4)作为驱虫药加入动物饲料; 

应用浓度 

潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化。推荐使用浓度为50-1000 μg/mL浓度需要杀灭曲线来确定。 

哺乳动物细胞·200-500 μg/mL;细菌/植物细胞·100-300 μg/mL;真菌·300-1000μg/mL 

产品使用

使用一:杀灭曲线确定杀死浓度(仅作参考,因个人检测体系而异)

1)往组织培养级的96孔板内加入未转染细胞,细胞密度约50-200细胞/;细胞贴壁之后,往每孔加入含不同浓度(如50-1000μg/mL,至少5个浓度)潮霉素B200μL新鲜培养基;

2375% CO2培养箱孵育细胞10-14天;

3)培养5-7天后更换新的培养液,培养液内含有相应浓度的潮霉素B

410-14天后使用细胞增殖方法如MTTCCK-8等评估细胞活力;也可以通过检测细胞克隆数或百分比汇合率来确定毒性效应。一般选择在10-14天能够杀死所有细胞的zui小浓度为筛选浓度。

使用二:筛选稳定转染细胞

(1)对于贴壁细胞,直接吸去60mm培养皿内的转染细胞培养基,然后加入含有潮霉素B的新鲜培养基5-6ml;对于悬浮细胞,无菌条件250x g,离心10min除去旧的转染细胞培养基,然后悬浮在约5ml的含潮霉素B的新鲜培养基;

(2)5-7天后,如上方法更换含有潮霉素B的新鲜培养基;

(3)再孵育细胞5-7天;

(4)10-14天孵育后,培养体系中只含有能够表达潮霉素B抗性表型的活细胞。因此筛选之后如步骤一,更换不含潮霉素B的新鲜培养基。 

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