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公司动态首页 > 公司动态 想把PEI转染试剂使用好,它的操作流程你必须清楚
  • 想把PEI转染试剂使用好,它的操作流程你必须清楚
  • 点击次数:3595 更新时间:2022-02-24
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  •   PEI转染试剂是通过纳米技术合成,通过物理作用与核酸结合,浓缩包裹核酸,从而保护核酸免受免疫系统破坏,同时增强核酸进入细胞核中表达。不含任何动物来源成分,由于处于纳米尺度,粒径小,不易引起免疫反应,不影响动物和器官组织的功能,可以多次在同一动物注射。
     
      PEI转染试剂的分类:
      第1代阳离子纳米聚合物转染试剂,系聚乙二胺类转染试剂,占到市场上90%以上,十分适合于一般实验。但用于新药研究,三期临床有风险。因为细胞毒性大。
      第2代阳离子纳米聚合物转染试剂,系聚alpha赖氨酸组氨酸类转染试剂,大大降低了细胞毒性。
      第3代阳离子纳米聚合物转染试剂,系聚epsilon赖氨酸组氨酸类转染试剂,基本消除了细胞毒性。国内已有生产。
     
      PEI转染试剂的操作流程:
      1、细胞铺板:
      提前一天将细胞种植在六孔板中,以转染时细胞密度在70%~80%为宜。
      2、转染过程:
      ①、在转染前2h,移除细胞上原有的培养基,换为新鲜的*培养基。
      ②、将2ug质粒DNA用50uL无血清稀释液稀释,充分混匀制成DNA稀释液。
      ③、向DNA稀释液中直接加入4uL转染试剂,室温静置10~15min。转染复合物配制完成。
      ④、将转染复合物加入细胞培养基中,轻柔混匀。
      ⑤、继续培养24~48h,收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆。
      ⑥、使用本产品转染后一般在24h开始进入表达高峰期,36~48h达到表达高峰,相对于脂质体转染试刘,达到峰值的时间延后约6~12h。
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