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  • 有了它,你就可以放心大胆的使用细胞膜荧光探针
  • 点击次数:1108 更新时间:2021-08-26
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  •    细胞膜荧光探针是一种亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构进入细胞膜后,本产品在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,细胞膜荧光探针被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。可以用标准的 FITC滤光片检测。
     
      细胞膜荧光探针通常不会明显影响细胞的生存力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂。除了简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
     
      细胞膜荧光探针的使用方法:
      1、染色液制备:
      a、配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。
      b、工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 μM的工作液。
      
      2、悬浮细胞染色:
      a、悬浮细胞密度为1×106/mL加入到工作液中。
      b、在37 ℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
      c、染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。
      d、倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。
      e、重复c、d步骤两次以上。
      
      3、粘壁细胞的染色:
      a、使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
      b、从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
      c、在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
      d、在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
      e、吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
      
      4、流式细胞仪检测:
      染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。
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