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  • 关于胎牛血清是什么采集过程如何的问题,这里有答案
  • 点击次数:2429 更新时间:2020-10-16
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  •  血清通常在细胞培养中作为基础生长培养基的添加剂。常用血清是胎牛血清(FBS),也称FCS。胎牛血清是从适合人类卫生习惯的农场收集的。有时,也可能用其他的牛血清,如新生牛血清或者供体牛血清。在细胞培养中,血清供应了丰富的高分子蛋白,低分子量营养物,疏水载体蛋白和其他体外细胞生长必要的成分如激素和粘附因子。同时,血清可以增加培养基的缓冲能力或中和有毒成分,起到保护细胞的作用。在细胞培养过程中是否选择添加血清,主要根据基础培养基化学成分,培养细胞的类型和培养体系而定。
     
    1、采集
    在胎牛血清生产过程中,全血使用无菌一次性塑料袋收集,待凝结后分离,收集和冷冻储存血清。控制胎牛血清的初始收集是控制终血清产品质量的关键因素。只有初始原料符合我们的规范时才能允许生产。
     
    2、血清原料
    在市场存在两个胎牛血清标准:美国农业部标准(USDA)和欧洲标准。美国农业部标准,原始血清必须采自未发生疯牛病(BSE)和口蹄疫(FMD)疫情的国家,才可自由进口到任何国家,用于安全生产。而且研究者只有使用符合这种标准的血清,才被允许将其细胞和细胞产品送至其他同样有严格进口条款的国家,进行合作交流。
     
    3、处理过程
    优选数个批次冻存血清进行解冻,检验其内毒素和血红素的含量,满足标准的才能在冷藏条件下充分混合继续加工,进一步进行过滤除菌。BioInd依次通过预过滤和膜过滤来处理胎牛血清。zui后的过滤步骤为连续三次用100nm的滤膜过滤。过滤结束,血清采用无菌工艺进行分装,整个过程有效确保zui终产品无菌。血清生产的空气洁净度为100级。所有分装工作台都通过高效微粒空气过滤器过滤,并保持正压分装环境,对总微粒、悬浮微粒数和压力进行监控。分装后,终产品迅速-20度冻存,并隔离,直到所有的质量控制检测完成。
     
    4、FBS质量控制
    每批胎牛血清检测确认符合各项标准,并以书面的方式记录在质检报告中。
     
    具体优势:
    本胎牛血清不仅适用于常规的细胞培养,更适合用于一些要求较高的细胞的培养。
    血清凭借其优良的品质、*的可靠性和良好的技术支持,赢得广大研究人员的信任。
    本胎牛血清从血液收集到终产品检验和审核的每一个步骤,都采用设备和标准操作程序,保证高品质和各批次的一致性。所有操作符合GMP (Good Manufacturing Practices for Drug)标准。
    本产品符合美国的FDA质量体系要求,pH值、渗透压、血红蛋白浓度、内毒素水平、总蛋白等多项指标检测合格,无细菌、真菌、支原体及病毒污染,具有高质量和高稳定性。
    本胎牛血清来源清晰,具有可追溯性。本血清来源于澳洲。
    本胎牛血清为*制品,不含任何人为的添加成分,可应用于各种常规的细胞培养,特别适合于一些要求较高的细胞的培养,为细胞提供必须的营养物质和多种生长因子,有效促进细胞生长。
     
    胎牛血清使用中的常见问题(不*整理)
     
    1、如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?
    将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
    长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。
    我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
     
    2、血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?
    沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。
     
    3、实验室如何选择适合的血清?
    国内一致认为HYCLONE的血清是好的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。所以,我一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司由于刚刚进入中国,度不高,但是其实在国外已经做得很不错了,如Wisent等,他们在国内有办事处,我会从那里拿,血清的品质和HYCLONE不相上下,但价格相对优惠很多。
     
    4、 如何避免血清中产生沉淀?
    按如下操作可避免沉淀的产生:
    (1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
    (2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。
    (3) 勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
    (4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
    (5) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
    (6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
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