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  • 分析ELISA检测试剂盒的操作步骤和注意事项
  • 点击次数:1507 更新时间:2020-05-27
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  •    ELISA检测试剂盒法检测具有高效、快捷、易批量操作等优点,不同的生产厂家提供不同种类,不同类型的Elisa试剂盒产品,为科研用户带来极大的方便。ELISA检测试剂盒能够针对特定检测源,制备特异性抗原抗体,根据应用需要量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。
     
      操作步骤:
      1、从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
      2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
      3、样本孔中加入待测样本 50μL;空白孔不加。
      4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
      5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次。
      6、每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
      7、每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
     
      ELISA检测试剂盒的注意事项:
      1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
      2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
      3、消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。
      4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
      5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
      6、在储存和温育时避免强光直接照射。
      7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
      8、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
      9、不能使用过期产品。
      10、如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
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