上海复申生物现货供应Zeocin博莱霉素,
Invitrogen公司Zeocin博莱霉素
产品订购信息:
产地 | 目录号 | 品名 | 规格 | 价格 | * |
Invitrogen | R250-01 | Zeocin™ Selection Antibiotic (100 mg/mL) | 125mg | ¥450.00 | 复申 |
Invitrogen | R250-01 | Zeocin™ Selection Antibiotic (100 mg/mL) | 8 x 1.25 mL | ¥3,246.00 | 复申 |
Invitrogen | R250-05 | Zeocin™ Selection Antibiotic (100 mg/mL) | 50 mL | ¥14,533.00 | 复申 |
使用:
1、液体Zeocin可用于细胞培养。
2、用于筛选转化株的Zeocin浓度根据PH值和盐浓度改变。
3、PH 越高,盐浓度越低Zeocin活性越大。
4、普通大肠杆菌菌株筛选可在25 µg/ml zeocin浓度的低盐LB琼脂培养基中进行,PH 调至7.5 。
5、动物细胞筛选:根据不同细胞系从100 到 750 µg/ml 。
6、植物细胞筛选:根据不同的细胞种类和培养基从50到250µg/ml 。
7、酵母筛选:取决于种属和培养基,S. cerevisiae Sh ble 转化株在50µg/ml浓度的YPD培养基中筛选,PH7.0.
举例:
构建融合Zeocin和GFP双筛选标记质粒pcB-Zeo-GFP。方法质粒LeCo-G/Zeo含有Zeo-GFP融合基因片段,通过PCR反应、BamHI酶切后连接替换空白质粒pCB的筛选基因gpt,通过菌落PCR,酶切图谱分析及测序分析鉴定重组质粒,构建成功后将其与野生型痘苗病毒进行位点特异性同源重组,经Zeocin药物筛选2代后,用流式细胞仪观察重组痘苗病毒GFP表达。结果经菌落PCR,1号、5号和10号菌落中扩增出426bp的目的条带,与预期的大小**,经酶切分析和DNA测序进一步验证了重组质粒pCB-zeo-GFP;该质粒与野生型痘苗病毒同源重组,得到了重组的痘苗病毒;Zeocin筛选2代后,病毒上清感染细胞,流式细胞分析7.18%的细胞中有GFP的表达,而阴性对照仅有1.43%;Zeocin药物筛选5代后,通过激光共聚焦可在80%以上的细胞中观察带GFP;提取的重组痘苗基因组DNA也扩增出预期大小目的条带。结论含Zeocin和GFP双筛选标记的新型重组痘苗病毒不仅具有可观察性且具有药物抗性,非常容易进行筛选鉴定。
Zeocin是Phleomycin D1的商业名称,是从Streptomyces verticillus(轮枝链霉菌)突变株培养肉汤中分离到的一种铜螯合的糖肽抗生素,属于bleomycin(博莱霉素)家族,在细菌、植物细胞和哺乳动物细胞上都能发挥活性。Zeocinzui重要的应用是用于筛选携带Sh ble基因的转染细胞。
Invivogen公司
产品订购信息:
产地 | 目录号 | 品名 | 规格 | 价格 | * |
Invivogen | ant-zn-1 | Zeocin™ | 1g (10 x 1 ml) | ¥2,744.00 | 复申 |
Invivogen | ant-zn-5 | Zeocin™ | 5g (50 x 1 ml) | ¥10,598.00 | 复申 |
Invivogen | ant-zn-5b | Zeocin™ | 5 g (50 ml bottle) | ¥9,884.00 | 复申 |
Invivogen | ant-zn-1p | Zeocin™ | 1 g (powder) | ¥2,380.00 | 复申 |
Invivogen | ant-zn-5p | Zeocin™ | 5 g (powder) | ¥8,946.00 | 复申 |
Invivogen公司产品推荐使用浓度:
1、大肠杆菌
Zeocin抗性的转化子可以在低盐LB琼脂糖培养基(yeast extract 5g/l, Tryptone 10g/l, NaCl 5g/l, Agar 15g/l,pH 7.5),25ug/ml Zeocin的条件下筛选。invivogen公司的FastMedia™ Zeo培养基可助您得到*筛效果。
2、哺乳动物
细胞系 | 种属 | 组织 | 培养基 | Zeocin(ug/ml) |
B16 | mouse | melanoma | RPMI | 20-250 |
CHO | hamster | ovary | DMEM | 100-500 |
COS | monkey | kidney | DMEM | 100-400 |
293 | human | kidney | DMEM | 100-400 |
Hela | human | uterus | DMEM | 50-100 |
J558L | mouse | melanoma | RPMI | 400 |
MCF-7 | human | Breast adenocarcinoma | DMEM | 100-400 |
MEFs | mouse | embryonic fibroblasts | DMEM | 200-400 |
THP-1 | human | Leukemic monocytes | RPMI | 200
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