在基因治疗、细胞转染等众多生物医学研究中，PEI转染试剂发挥着关键作用。以下是它的详细配制步骤。
材料和试剂准备
在进行
PEI转染试剂的配制前，需要准备好相关材料和试剂。包括高纯度的线性PEI粉末、合适的缓冲液（如HEPES缓冲液）、核酸样品（如质粒DNA）以及适量的水等。
第一步：配制PEI溶液
称取适量的线性PEI粉末，通常根据所需浓度和转染体系来确定具体用量。一般来说，可将0.5 - 1 g的PEI粉末溶解于适量的无水乙醇中（例如5 - 10 mL），搅拌至全部溶解，得到PEI乙醇溶液。注意要在通风良好的环境下操作，因为乙醇具有一定的挥发性。
第二步：脱醇处理
将PEI乙醇溶液缓慢加入到大量预冷的去离子水中（例如100 - 200 mL），边加边搅拌，使乙醇充分挥发，得到无醇的PEI溶液。这一步非常关键，因为乙醇可能会对后续的细胞产生毒害作用。
第三步：调节pH值
使用pH计测量PEI溶液的pH值，并将其调节至合适的范围（通常在7.0 - 7.5之间）。可以使用1 M的NaOH或HCl溶液进行滴定调节，同时不断搅拌溶液，使pH值稳定在目标范围内。
第四步：确定转染浓度
根据转染实验的具体需求，进一步稀释PEI溶液至合适的浓度。一般来说，常用的转染浓度范围为1 - 5 μg/mL。
第五步：加入核酸样品
在含有适量细胞培养液的细胞培养板中，加入准备好的核酸样品（如质粒DNA），然后缓慢加入配制好的PEI溶液，使核酸与PEI按照适当的摩尔比（通常为1:3 - 1:5）混合，轻轻混匀。
第六步：静置孵育
将转染混合体系放置在37℃、5% CO?的培养箱中静置孵育一段时间（一般为4 - 6小时），使PEI与核酸充分结合并进入细胞。
第七步：更换培养液
孵育结束后，小心地吸出旧的培养液，加入新鲜的全部培养液，继续培养细胞。
通过严格按照上述步骤进行PEI转染试剂的配制，可提高转染效率，为后续的基因治疗和细胞研究提供有力保障。
