鬼笔环肽是从一种剧毒磨菇中分离出来的一种多肽物质，属于毒伞肽类毒素，是一种强烈毒素。C35H48N8O11S。无色，细针状结晶。分子量788.87g/mol， 熔点281oC.
1、工作液准备：
本品以溶于甲醇的20μM储存液形式提供，总量为300μl。按照100nM的工作液浓度来换算，可制备总量为60ml的工作液。建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，-20℃避光冻存，一年稳定。开始实验前，使用1×PBS缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为：80~200nM。现配现用。
2、染色步骤：
a、细胞爬片生长24h，使其密度达到50%汇合度。
b、吸掉培养液，37℃预热的1×PBS（pH7.4）清洗细胞2次。
c、使用溶于PBS的4%甲醛溶液进行细胞固定，室温固定10min。
d、室温条件下，用PBS清洗细胞2~3次，每次10min。
e、室温条件下，用丙酮（≤-20℃）脱水或者用0.5%TritonX-100溶液透化处理5min。
f、室温条件下，用PBS清洗细胞2~3次，每次10min。
g、取200μl配制好的FITC标记鬼笔环肽工作液，覆盖住盖玻片上的细胞，室温避光孵育30min（通常情况下，4℃~37℃孵育皆可）。
h、用PBS清洗盖玻片3次，每次5min。
i、使用200μlDAPI溶液（浓度：100nM）对细胞核进行复染，约30s。
j、用PBS清洗盖玻片，然后倒置在已经滴有一滴Fluoromount-GTM水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封片剂，然后用指甲油封片。此法制备的标本玻片可置于4℃避光保存，通常6个月内可继续做F-actin染色分析。
k、荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察，选择FITC激发/发射滤片（Ex/Em=496/516nm）和DAPI激发/发射滤片（Ex/Em=364/454nm）。
