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  • 根据不同组织类型合理选用组织细胞固定液
  • 点击次数:2128 更新时间:2015-11-12
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  •    凡进行病理检验的各种组织都需要进行固定,固定可使组织、细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置。

      对不同类型的组织应适当合理地选择组织细胞固定液,特殊病例或特殊物质应选择特殊的组织细胞固定液。有的固定液对于组织有膨胀作用。固定剂是一种化学试剂,有液体和固体之分,一般使用较多的是液体,而固体固定剂如多聚甲醛,则多用于实验研究的组织固定。

      由于各种固定液对不同的组织有不同的作用,因此许多专家将根据各种固定液的优缺点,配制出许多混合液的方法来,给组织的良好固定起到了非常积极的作用。但是,值得指出的是并非所有的固定液都不是十全十美的,例如,酒精、甲醛、醋酸固定液,对组织固定很好,组织中各物质的染色也十分清晰,但对固定脱水盒为铜质的组织时,效果就不好,原因是醋酸跟酮可发生反应,产生醋酸铜,沉淀于组织中,可造成对抗原的损害,对于免疫组织化学的显示,经实验证明:可呈弱阳性乃至阴性。由此可见,组织细胞固定液的选择正确与否决定着对某些病例的免疫组化标记的成败关键。在我们的日常工作科研中,对于组织的固定,应有针对性的选择,方能获得满意的效果。

      下面给大家介绍几种常见的组织细胞固定液

      1、中性缓冲甲醛。该液能够固定大多数组织结构,对脂类有较好的固定效果。免疫组化、原位杂交等试验都可以使用。本液还可以长时间存放,是实验室常备的组织细胞之一。固定液浸透较慢,固定时间不限,浸透之后可以长时间存放(免疫组化和原位杂交标本建议不要这么做)。美中不足是染色时酸性染料着色不佳,并且本液对糖类没有固定作用。

      2、Bouin。过去常用的一种组织细胞固定液,主要用于软化皮肤或者富含结缔组织的标本,在胚胎标本处理中使用很广。用本液处理后,酸性染料着色鲜艳。但是,由于含有苦味酸,不能用于原位杂交等实验检测。此外,本液对很多细胞器的破坏较大,尤其不适于固定肾脏标本。经本液固定的标本,尺寸应尽可能小,否则内外固定的效果有所差别。本液可以较长时间存放,但标本在其中不应久存,固定8 ~ 24 h为宜。

      3、AAF。该液由醋酸(A)、酒精(A)和甲醛(F)为主要成分,广泛用于动植物组织的固定和各种实验检测,植物固定则是。固定液渗透均一,速度很快。固定时间一般为4 ~ 24 h。此液处理后,染色结果细腻,但酸性染料着色力下降。本液配制后可以短时间放置。

      4、Helly,Susa,Zenker。这是三种比较相近的固定液,含有汞盐和重铬酸钾。经这类固定液处理,标本对酸性和碱性染料均有较好的亲和能力。染色处理前需要脱汞和脱碘操作。目前除了几种传统染色更鲜艳外,并无其他优势。

      5、Zamboni。用于免疫组化和免疫电镜的组织细胞固定液。保存细微结构和抗原特性的固定液之一。固定液浸透速度较慢,要求标本不能过大,常用于血管灌注。该液可以长时间存放,标本在其中也可以保存较长时间,抗原封闭作用相对较弱。由于含有苦味酸,故不用于原位杂交试验。

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