很多的科研工作者一直的困扰:
Tris学名叫三羟甲基氨基甲烷,它和Tris-base是一个东西。
Tris-cl和Tris-HCl是一个东西,就是写法上有所不同。
Tris-HCl就是在Tris-base的溶液中加入适当量的盐酸,调成你所需要的PH值罢了。
Tris系列的缓冲液可以灭菌------虽然网上有人说不可以。此处详见《分子克隆》
Tris系列的缓冲液(或HEPES)可以用DEPC处理吗?
答案:能!经常在网上看到说不能的原因是因为这类含胺试剂加速DEPC的水解。但如果你一定要用DEPC处理的话,把DEPC的终浓度增大至1%,所达到的效果就会和0.1%的效果一样的。
经常实验的同学会发现不少实验书后面的附录中会有如下的Tris-HCl缓冲液配制图表:
常用Tris-HCl缓冲液配制:
Tris-HCl(0.05mol/L,25℃)
50ml 0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后,加水稀释至100ml
pH x/ml pH x/ml
7.10 45.7 8.10 26.2
7.20 44.7 8.20 22.9
7.30 43.4 8.30 19.9
7.40 42.0 8.40 17.2
7.50 40.3 8.50 14.7
7.60 38.5 8.60 12.4
7.70 36.6 8.70 10.3
7.80 34.5 8.80 8.5
7.90 32.0 8.90 7.0
一定要注意的是,这个表格所列出的常数是可信的,但你要考虑你买的药品是否可信,的药品恐怕也会有批次上的误差,所以个人认为,要想配准Tris缓冲体系的PH值,还是在PH计监测的同时加入盐酸的为好(严禁使用微量加样器吸取盐酸!!!)。