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  • 分享!线粒体膜电位荧光探针用来检测细菌膜电位的工作原理
  • 点击次数:2575 更新时间:2022-09-20
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  •   线粒体膜电位荧光探针是一种广泛用于检测线粒体膜电△Ψm位的理想荧光探针。其染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内,电位荧光探针聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585nm,Em=590nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,本产品只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514nm,Em=529nm)。线粒体膜电位荧光探针不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。观察时,只需使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
     
      线粒体膜电位荧光探针用于检测细胞的线粒体膜电位时常用的浓度范围为1~20μg/mL,对于很多细胞适宜采用的浓度为10μg/mL。
     
      线粒体膜电位荧光探针用来检测细菌膜电位的工作原理在于:
      线粒体膜电位荧光探针在所有细菌细胞内发绿色荧光,由于更高的膜电位引起染料分子发生自聚作用,使得染料的荧光往红色发射波长处迁移,红色荧光强度增高,此时红色/绿色荧光信号比高。质子离子载体比如CCCP,通过去除质子梯度来破坏线粒体膜电位,从而导致红色荧光强度降低,此时红色/绿色荧光信号比降低。线粒体膜电位荧光探针的最大激发和发射波长约482nm和497nm。经线粒体膜电位荧光探针标记的细胞用流式细胞仪分析(用488nm激发,分别用适合FITC(绿色)和Texas Red(红色)的发射滤片来检测)。
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